雙抗夾心化學發(fā)光法（CLIA）是將雙抗體夾心法與化學發(fā)光檢測技術結合在一起的檢測方法。它的一般實驗步驟包括：將特異性針對待測抗原的抗體包被于 96 孔微孔板中，制成固相載體；向微孔中分別加入標準品或標本，使待測抗原與連接于固相載體上的抗體結合；此后加入生物素化的針對待測抗原的抗體，形成夾心；再將未結合的生物素化抗體洗凈后，加入 HRP 標記的親和素，再次徹底洗滌后加入魯米諾發(fā)光底物，并用光子計數(shù)器，讀出各孔的相對光度值（RLU）。此法與雙抗夾心ELISA法的區(qū)別在于采用了增強型的ECL發(fā)光體系作為發(fā)光底物試劑來實現(xiàn)檢測過程。由于其靈敏度高，檢測范圍跨度大，且不存在放射性污染，該方法被認為是最有前途的實驗室診斷方法之一。

原理圖如下: