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蛋白活性實(shí)驗(yàn)-人白介素6(IL6)

活性人白介素6(IL6)

 

白細(xì)胞介素6 (IL-6)是一種白細(xì)胞介素,它既是一種促炎細(xì)胞因子,又是一種抗炎的肌氨酸。目前的數(shù)據(jù)表明IL-6通過Jak / Stat3通路直接應(yīng)用雌激素受體陽性的乳腺癌細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)。

活性實(shí)驗(yàn):本實(shí)驗(yàn)旨在檢測IL-6對雌激素受體陽性MCF-7細(xì)胞的增殖具有抑制作用。細(xì)胞接種于96孔板,密度5000細(xì)胞/孔,重復(fù)3,過夜,然后用血清DMEM替換培養(yǎng)基中豐富的IL-6。孵育96h后,通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)由CCK-8試劑盒測定。簡要來說就是,每孔加入10μl CCK-8溶液,然后37°C孵育1 - 4小時(shí),取上清進(jìn)行450 nm處吸光值的測定。

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:倒置顯微鏡觀察IL-6MCF-7細(xì)胞增殖的抑制作用細(xì)胞和被CCK-8檢測結(jié)果分別如Figure1Figure2所示(在這種情況下存在劑量依賴的相關(guān)性暫未發(fā)現(xiàn))。

 

A                                                                                                                    B

Figure 1. The inhibitory effect of IL-6 on cell proliferation of MCF-7 cells .

(A) MCF-7 cells cultured in serum-free DMEM, stimulated with 100ng/ml IL-6 for 96h;

(B)Unstimulated MCF-7 cells cultured in serum-free DMEM for 96h.

Figure 2. The inhibitory effect of IL-6 on cell proliferation of MCF-7 cells detected by CCK8