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蛋白產品選購使用有疑問?常見問題一次講清

Q1 蛋白如何保存和重懸?


A1 蛋白的保存方法:如下圖,參見說明書[STORAGE AND STABILITY],在推薦的條件下冷凍儲存,蛋白自收到之日起至少12個月內保持穩(wěn)定。重懸后,如需長期保存,建議分裝后,-80℃冷凍保存,避免反復凍融。

蛋白的重懸:如下圖,參見說明書[USAGE]。應選用推薦的buffer,并按產品說明書推薦的重懸濃度重懸蛋白。確定蛋白質量后,通過將質量除以濃度來計算體積(濃度=質量/體積)。例如,一瓶100μg的蛋白需要重懸至蛋白濃度500μg/mL。通過計算:100μg/500μg/mL=0.2mL,因此要獲得該濃度的蛋白需向瓶中加入0.2mL(200μL)的蛋白buffer。




Q2 重組蛋白凍干前的buffer和濃度?


A2 蛋白凍干前的buffer和濃度:參見說明書[PROPERTIES]中的“Buffer formulation”和“Original Concentration”。見下圖,蛋白凍干前的濃度為450μg/mL,蛋白凍干前的buffer是“PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose”。



Q3 重組蛋白分子量大小和全長不同的原因?


A3 ① 重組蛋白可能僅包含了蛋白的片段,而非全長。請查看說明書[PROPERTIES]中的“Residues”,這部分展示了重組蛋白的序列信息。如下圖,蛋白序列為Val25~Glu352。

 ② 重組蛋白包含蛋白標簽,重組蛋白的分子量是靶標蛋白和蛋白標簽分子量的和。不同的蛋白標簽分子量大小不同。說明書[PROPERTIES]中的“Tags”部分展示了重組蛋白的標簽信息。如下圖,重組蛋白帶有N端His Tag。



Q4 重組蛋白可以用于活性實驗嗎?


A4 對于重組蛋白,我們暫未檢測其活性,不確定蛋白是否具備活性。如果客戶想要用于活性實驗,可以先做預實驗。以RPA124Mu01為例。

產品鏈接:

https://www.cloud-clone.com/manual/Recombinant-Transforming-Growth-Factor-Beta-1-(TGFb1)-RPA124Mu01.pdf


對于活性蛋白,可以參考說明書[ACTIVITY],給出了活性驗證方案和結果。以APA899Hu61為例。

產品鏈接:

https://www.cloud-clone.com/manual/Active-Osteopontin-(OPN)-APA899Hu61.pdf

如果客戶是用于其他的活性實驗,與我們驗證的方案不同,請先進行預實驗。



Q5 重組蛋白的buffer可以更換嗎?


A5 如果客戶對于蛋白buffer有特殊要求,除了產品頁面上顯示的buffer,云克隆還接受定制配方(不含tris、不含skl等)。請聯系云克隆銷售團隊/當地的分銷商,分享您的請求就能獲取解決方案。



Q6 重組蛋白是carrier free還是animal free?


A6 重組蛋白產品是“carrier free” & “animal free”。



Q7 我收到蛋白產品時溫度已接近室溫,但產品標簽和數據顯示它將在-80oC下儲存。這是一個錯誤嗎?產品活性是否會受到影響?


A7 蛋白產品可在室溫下運輸,不會受到影響。凍干提高了產品的穩(wěn)定性,同時減少了包裝材料和運輸費用。我們對凍干產品進行了“加速穩(wěn)定性測試”,數據表明,7天內室溫運輸的凍干產品可保持完全活性。我們將保證并支持在該時間段內交付并妥善儲存的產品性能。如果產品未在7天內送達,或在收到后未正確儲存,請聯系技術人員獲取解決方案。



Q8 訂購了50μg蛋白,但是收到的蛋白量明顯高于50μg。這是一個錯誤嗎?


A8 瓶中的粉末是靶標蛋白以及蛋白緩沖液鹽離子。凍干前蛋白溶解在蛋白緩沖液中,凍干僅去除了水分,緩沖液中的鹽離子和靶標蛋白形成了粉末。所以瓶中的物質質量比訂購的蛋白量(50μg)多。



Q9 蛋白稀釋液能訂購嗎?


A9 可以訂購蛋白稀釋液。

產品鏈接:https://www.cloud-clone.com/incrementServices/IS119.html



Q10 除了產品說明書上列出的應用,蛋白還能用于其他應用嗎?


A10 對于未列出的應用,并不代表該應用不適用,只是暫時未驗證。請廣大客戶自行驗證,對蛋白應用進行擴展。完成實驗分享數據,我們可以提供獎勵。



Q11 云克隆可以提供蛋白產品定制服務嗎?


A11 武漢云克隆為客戶提供從基因到蛋白的一站式服務,客戶也可以根據自身的需求靈活的選擇服務項目或個性化的定制服務。目前云克隆建有原核(E.coli)表達系統(tǒng)與真核(酵母、桿狀病毒一昆蟲細胞、哺乳動物細胞)表達系統(tǒng)的重組蛋白表達平臺。我們將在不斷創(chuàng)新和改進的基礎上,始終致力于為每一位客戶提供最全面、最優(yōu)質的服務。

蛋白定制流程:

基因克隆或者基因合成 →亞克隆質粒構建 →表達質粒構建 →表達條件優(yōu)化 →蛋白表達 →蛋白純化 →后期處理:去除內毒素、融合標簽切除、活性測定等。



Q12 如何從蛋白產品說明書中獲取有效信息?


A12 客戶咨詢的很多問題都能在產品說明書中找到。如蛋白來源,表達宿主,蛋白片段,蛋白標簽,蛋白純度,凍干前buffer,凍干前濃度,蛋白應用,等電點,蛋白分子量,蛋白用法(重懸方法),保存方法,以及驗證結果圖。

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