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組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)活性蛋白

2025-08-28

組織金屬蛋白酶抑制因子4（TIMP4）是基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）家族的重要成員，能夠特異性抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的活性，從而調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解與重塑。TIMP4在心臟、腦、卵巢等組織中高表達(dá)，具有抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)及維持組織穩(wěn)態(tài)等功能。研究表明，TIMP4通過抑制MMPs（如MMP-2、MMP-9）的蛋白水解活性，影響腫瘤微環(huán)境，抑制癌細(xì)胞的侵襲和血管生成。在心血管疾病中，TIMP4可減輕心肌纖維化，改善心臟功能。此外，TIMP4在神經(jīng)系統(tǒng)疾病（如阿爾茨海默?。┲锌赡芡ㄟ^減少異常ECM降解發(fā)揮保護(hù)作用。然而，TIMP4的作用具有組織特異性，在某些癌癥（如乳腺癌、前列腺癌）中可能呈現(xiàn)促腫瘤或抑腫瘤的雙重作用，具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。TIMP4作為MMPs的關(guān)鍵調(diào)控因子，在疾病診斷和治療中具有潛在應(yīng)用價(jià)值。

○ 產(chǎn)品貨號(hào)：APA130Mu01

○ 活性驗(yàn)證

通過熒光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH₂的酶切實(shí)驗(yàn)，我們檢測(cè)了重組小鼠TIMP4（分子量22.55kDa）對(duì)重組人MMP2（rhMMP2）活性的抑制效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)體系采用50mM Tris、10mM CaCl₂、150mM NaCl、0.05%Brij-35（pH7.5）的緩沖系統(tǒng)。將100μg/mL的rhMMP2經(jīng)1mM APMA于37℃活化1小時(shí)后，與系列稀釋的rmTIMP4溶液（8μL）及緩沖液（59.2μL）混合反應(yīng)2小時(shí)。取50μL五倍稀釋的反應(yīng)液與20μM底物等體積混合啟動(dòng)反應(yīng)，以320nm/405nm的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)進(jìn)行5分鐘動(dòng)力學(xué)檢測(cè)。如圖1所示，重組小鼠TIMP4能顯著抑制rhMMP2的蛋白水解活性，其半數(shù)抑制濃度IC50＜0.75nM，展現(xiàn)出強(qiáng)效的MMP2抑制能力。該結(jié)果證實(shí)TIMP4通過直接結(jié)合MMP2發(fā)揮其生理調(diào)控功能。

○ 結(jié)果展示