磁珠化學(xué)發(fā)光雙抗夾心酶免疫測(cè)定法檢測(cè)原理
查看詳情磁珠化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定，是集磁珠分離技術(shù)，靈敏的化學(xué)發(fā)光分析和特異的抗原抗體免疫測(cè)值與一體的檢測(cè)技術(shù)。其中磁珠化學(xué)發(fā)光雙抗夾心酶免疫測(cè)定法用酶標(biāo)記抗體，代測(cè)標(biāo)本中目的抗原，以及磁顆?？贵w形成夾心結(jié)構(gòu)，通過磁場(chǎng)把結(jié)合狀態(tài)（復(fù)合物：酶標(biāo)記抗體+目的抗原+磁顆?？贵w）和游離狀態(tài)的非目的物以及酶標(biāo)記抗體分離開，加入發(fā)光底物進(jìn)行發(fā)光反應(yīng)，通過對(duì)發(fā)光強(qiáng)度的檢測(cè)進(jìn)行定量或定性測(cè)定。此技術(shù)屬于酶免疫測(cè)定的一種。區(qū)別于酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒，最后一步酶反應(yīng)所用的底物為發(fā)光劑，通過發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光在特定的儀器上......
ERK5信號(hào)通路
查看詳情前期專題我們介紹了MAPK級(jí)聯(lián)激活通路，主要包括細(xì)胞外信號(hào)調(diào)控的蛋白激酶（ERK）、c- Jun N端激酶（JNK）、P38MAPK以及ERK5 四條途徑，后3條均屬于應(yīng)激激活MAPK通路，其中ERK5通路作為一種非典型的 MAPK 通路，它的發(fā)現(xiàn)是比較晚的，但是研究卻很活躍。ERK5 由 816 個(gè)氨基酸構(gòu)成，長度幾乎是其他 MAPK 家族成員的 2 倍。ERK5 的N 末端包含有蛋白激酶區(qū)， C末端有一個(gè)獨(dú)特的 COOH，這有別于 MAPK 家族的其他成員，如圖1是ERK5的三維結(jié)構(gòu)。ERK5 的級(jí)聯(lián)反應(yīng)也是由 3 個(gè)相應(yīng)順序激活: 各種刺激因素激活 MEKK2 /3，再由 MEKK2 /3激活MEK5......
酸性 α- 葡萄糖苷酶-龐貝病的診斷金標(biāo)準(zhǔn)
查看詳情酸性α- 葡萄糖苷酶 (Glucosidase Alpha, Acid, GaA)，為淀粉水解酶類的一種。它能催化多糖水解，產(chǎn)生α- D-葡萄糖。同時(shí)它也具有轉(zhuǎn)糖苷作用，可將低聚糖中的α-1，4-糖苷鍵轉(zhuǎn)化成α-1，6-糖苷鍵或其他形式的鏈接，從而得到非發(fā)酵性的低聚異麥芽糖或糖酯、糖肽等。當(dāng)位于第17號(hào)染色體上編碼酸性α-葡糖苷酶的基因突變，造成體內(nèi)酸性α- 葡萄糖苷酶缺乏，糖原無法正常代謝，導(dǎo)致體內(nèi)糖原在骨骼肌、心肌和平滑肌等肌肉組織內(nèi)大量集聚，導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)肌肉病變。這種溶酶體貯積癥，被稱為龐貝病，也稱為酸性α -葡糖苷酶缺乏癥或II型糖原貯積......
補(bǔ)體C3在血清血漿中的檢測(cè)及應(yīng)用
查看詳情補(bǔ)體（Complement）主要分布在人和動(dòng)物的體液和細(xì)胞表面，活化后有生物活性，并可介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)的一組蛋白質(zhì)，又稱為補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體系統(tǒng)由近40種成分組成，大部分都是糖蛋白。補(bǔ)體的固有成分有13類，調(diào)節(jié)蛋白有10類；補(bǔ)體受體10多種。補(bǔ)體不耐熱，當(dāng)溫度達(dá)到56度，時(shí)間達(dá)到30分鐘時(shí)大部分補(bǔ)體會(huì)失活。補(bǔ)體不易保存，冷凍干燥，保存時(shí)間相對(duì)長一些。補(bǔ)體第三組分（Complement Component 3，C3）是補(bǔ)體的核心成分，分子量為195000，由19號(hào)染色體C3基因編碼。C3是血液中含量最大的補(bǔ)體成分，主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成。C3在補(bǔ)體經(jīng)......
MAPK級(jí)聯(lián)激活信號(hào)通路
查看詳情絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）是一組能被不同的細(xì)胞外刺激，如細(xì)胞因子、神經(jīng)遞質(zhì)、激素、細(xì)胞應(yīng)激及細(xì)胞黏附等激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。MAPK信號(hào)通路是利用逐級(jí)磷酸化過程將信號(hào)放大傳至細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子的活性，調(diào)控相應(yīng)基因的表達(dá)，進(jìn)而引起細(xì)胞反應(yīng)的一類重要信號(hào)系統(tǒng)。MAPK級(jí)聯(lián)激活是多種信號(hào)通路的中心，參與到細(xì)胞的分裂、分化、凋亡等多種生命過程，且在一些骨關(guān)節(jié)組織炎癥，癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移等病癥中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是以3 級(jí)激酶級(jí)聯(lián)激活的方式進(jìn)行的，如圖所示，首先M......
各種組蛋白的體外檢測(cè)及提取技術(shù)
查看詳情組蛋白（histones）是真核細(xì)胞核中染色質(zhì)中的強(qiáng)堿性蛋白質(zhì)，是真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白。組蛋白將DNA進(jìn)行壓縮并與DNA一起形成核小體，如果沒有組蛋白，染色體DNA解開，形成散亂的很長的DNA鏈。組蛋白的研究具有非常重要的意義。體內(nèi)組蛋白的異常會(huì)導(dǎo)致許多疾病，如慢性腎病等。同時(shí)有關(guān)組蛋白的修飾與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)，自身免疫病，腫瘤，神經(jīng)系統(tǒng)疾病，以及內(nèi)分泌疾病都非常相關(guān)。組蛋白有六種類型：H1、H2A、H2B、H3、H4及古細(xì)菌組蛋白，它們富含帶正電荷的堿性氨基酸，而DNA中主要帶負(fù)電荷，二者相互作用，使DNA纏繞在組蛋白上......
總蛋白定量方法簡(jiǎn)介及優(yōu)缺點(diǎn)
查看詳情蛋白質(zhì)定量是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)不可缺少的部分，該技術(shù)被廣泛的用于多個(gè)領(lǐng)域和行業(yè)，包括生物學(xué)科、食品檢驗(yàn)、臨床檢驗(yàn)、疾病診斷等。在實(shí)際應(yīng)用操作過程中，對(duì)樣本中蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的定量分析，是常用且重要的工作。盡管目前有多種總蛋白定量的方法，但是由于蛋白質(zhì)種類繁多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分子量差異大，且功能各異，暫無理想而通用的蛋白質(zhì)定量分析方法?，F(xiàn)介紹目前常用的定量方法以及優(yōu)選點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)工作者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，選取合適的定量方法。蛋白定量法可分為以下兩大類，化學(xué)檢測(cè)法，包括福林-酚法（Lowry）、二喹啉甲酸法（BCA）、......
一種高效無縫基因拼接技術(shù)
查看詳情隨著PCR技術(shù)的出現(xiàn)，人們逐漸的打開通往研究生命本質(zhì)的大門，這也使PCR技術(shù)成為了上個(gè)世紀(jì)最為偉大的技術(shù)之一。通過PCR技術(shù)能在體外迅速、大量、靈敏地?cái)U(kuò)增出目的基因片段，但是需要靈活的改造基因，只有目的基因片段是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，還需要一種高效的基因加工手段——基因拼接技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)操作過程中，無論出于基因改造、載體改造以及將來會(huì)出現(xiàn)的物種改造等多種涉及DNA操作的實(shí)驗(yàn)，都不可避免會(huì)使用到基因拼接技術(shù)。 1989年Horton等人提出了SOE法（Gene splicing by over lap extension）即通過復(fù)制時(shí)DNA鏈的交錯(cuò)延伸來實(shí)現(xiàn)基因拼接；......