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  • 病毒免疫中的關(guān)鍵角色:RIG-I樣受體

    病毒免疫中的關(guān)鍵角色:RIG-I樣受體近期,流感病毒高發(fā),在人與病毒漫長的共存與對抗史中,先天免疫系統(tǒng)始終是抵御病毒入侵的第一道防線。其中,RIG-I樣受體(RIG-I-like receptors,RLRs)作為細(xì)胞內(nèi)受體,在宿主抵御病原體感染,特別是病毒感染的天然免疫反應(yīng)中扮演著核心角色。然而,病毒也進化出了多樣的逃逸策略,與RLRs介導(dǎo)的免疫機制展開持續(xù)博弈。研究RLRs與病毒的相互作用,不僅為分析先天免疫調(diào)控機制提供理論基礎(chǔ),更為抗病毒藥物研發(fā)和疫苗設(shè)計開辟新方向。RLRs家族的核心成員RLRs家族主要包括視黃酸誘導(dǎo)基因I(RIG-I)......

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  • 破解磁珠丟失瓶頸: 云克隆多因子檢測試劑盒的高效解決方案及優(yōu)勢

    多因子檢測試劑盒因其單次實驗檢測的靶標(biāo)數(shù)量多,總體而言需要的樣本量較少、實驗時長較短而受到科研工作者的關(guān)注和青睞。但在實驗中,因為各種各樣的原因?qū)е麓胖閬G失致使實驗失敗的問題愈加凸顯。小云醬在多次實驗、反復(fù)驗證的基礎(chǔ)上,總結(jié)了以下操作建議供大家參考:1.高速離心處理樣本(16,000×g離心20-30分鐘)2.如有必要,重復(fù)離心(粘性物質(zhì)、顆粒物多的樣本)3.合理保存磁珠(4℃避光保存)4.充分振蕩,使磁珠懸浮(磁珠加入孔板前、儀器進樣前)5.減少不必要的洗板操作(加樣本/檢測溶液A后不洗板)6.注意洗板操作(保持磁......

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  • 多因子檢測試劑盒(Multiplex Assay Kit)磁珠讀數(shù)異常原因及解決方案

    基于流式熒光法的多因子檢測技術(shù)是在不同顏色或大小的編碼微球上包被不同的特異性抗體,以達到單個樣本可同時檢測多個靶標(biāo)因子,從而實現(xiàn)高通量的蛋白定量技術(shù)。云克隆公司有十多年的蛋白、抗體和ELISA試劑盒的研發(fā)經(jīng)驗,通過采用和ELISA一致的抗體對篩選和試劑優(yōu)化體系,在此基礎(chǔ)之上開發(fā)出了更高標(biāo)準(zhǔn)和更高性能的多因子檢測試劑盒(Multiplex Assay Kit),力求為客戶提供更便利更全面的分析工具。多因子檢測試劑盒自上市以來備受科研工作者的青睞,但由于和ELISA的操作方法大有不同,大家在使用過程中可能會遇到各種操作方面的問......

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  • 多因子試劑盒標(biāo)曲擬合

    多因子檢測技術(shù)是一種基于流式熒光法的多重檢測技術(shù),一次實驗可同時檢測多個靶標(biāo)分子,適用于蛋白質(zhì)、小分子、多肽等靶標(biāo)的檢測。相比傳統(tǒng)的單因子檢測方法,多因子檢測技術(shù)具有高通量、高靈敏度和特異性好的特點,同時還能節(jié)省樣本,提高檢測效率,有著廣泛的應(yīng)用前景。流式熒光法多因子檢測的免疫學(xué)原理與普通酶聯(lián)免疫吸附實驗相似,但信號檢測系統(tǒng)有所不同。多因子檢測也可以分為雙抗夾心和競爭法。雙抗夾心法是通過將已知的抗體偶聯(lián)在熒光微球表面,待測抗原與偶聯(lián)的抗體反應(yīng),加入生物素化的檢測抗體,形成雙抗夾心的結(jié)構(gòu),最......

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  • 細(xì)胞微囊泡——外泌體

    外泌體是一種直徑為30至150nm的膜分泌型囊泡狀結(jié)構(gòu),其拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)與細(xì)胞類似,并富含特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和多糖復(fù)合物。這些微小的細(xì)胞器由幾乎所有類型的細(xì)胞產(chǎn)生并釋放,自然存在于多種體液中,如腦脊液、唾液、肺泡灌洗液、乳汁、尿液和血液等。外泌體的生成過程是通過細(xì)胞膜上的出芽方式進行的,其中含有一系列與細(xì)胞膜密切相關(guān)的高階寡聚蛋白復(fù)合物,展現(xiàn)出顯著的分子異質(zhì)性。這一過程不僅是蛋白質(zhì)質(zhì)量控制的重要機制,而且外泌體在釋放到細(xì)胞外后,具備多重生物活性,如重塑細(xì)胞外基質(zhì)、向其他細(xì)胞傳遞信號和分子等。這種......

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  • HepG2-luc穩(wěn)定細(xì)胞系助力實驗研究

    熒光素酶(luciferase)在一定條件下可以催化熒光素(luciferin),產(chǎn)生自發(fā)光現(xiàn)象(如圖1)。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱。目前比較常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶,海螢熒光素酶等。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶組成的雙報告系統(tǒng)在基因的表達調(diào)控、信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用、高通量藥物篩選、siRNA和miRNA篩選等多個研究領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。 圖1. 熒光素酶與熒光素的發(fā)光反應(yīng)螢火蟲熒光素酶是目前研究中使用最為廣泛的熒光素酶。它由550個氨基酸組成,翻譯......

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  • 云克隆教你出完美Western Blot條帶

    在Western Blot(WB)的實驗過程中,總會遇到各種各樣的問題:沒有條帶,雜帶多,轉(zhuǎn)膜不成功,曝光時間把握不好……WB實驗周期長,操作步驟繁瑣。怎么在繁瑣的操作中快速找到問題所在是很多科研人員頭疼的問題。不要急,云克隆用多年積攢的WB實驗經(jīng)驗,為你分析解決WB實驗過程中出現(xiàn)的各種狀況。一、SDS-PAGE出現(xiàn)異常條帶1. 微笑現(xiàn)象可能原因:凝膠的中間部分凝固不均導(dǎo)致。解決辦法:待其充分凝固后再做實驗。2.拖尾現(xiàn)象可能原因:樣品融解效果不佳;電泳緩沖液時間過長;分離膠濃度過大引起。解決辦法:加樣前離心;加適量樣品促溶......

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  • 除疤大作戰(zhàn) — 減少疤痕形成的新思路

    疤痕很常見,在生活中磕磕碰碰就可能留下疤痕。然而疤痕一旦形成,則很難去除,目前醫(yī)學(xué)界仍無法完全消除疤痕。近期,有篇關(guān)于減少疤痕形成的研究登陸國際頂級期刊《Nature Communications》,為除疤提供了新的思路。 內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)是導(dǎo)致器官組織纖維化和疾病的主要原因,然而其機制尚未闡明。內(nèi)皮細(xì)胞具有強大的適應(yīng)和重組的再生能力,這是由于血管內(nèi)祖細(xì)胞(EVP)控制著內(nèi)皮細(xì)胞的層次結(jié)構(gòu)。通過分析,研究團隊發(fā)現(xiàn)兩個轉(zhuǎn)錄因子SOX9和RBPJ特異性地影響小鼠EVP的數(shù)量和調(diào)節(jié)譜系特化。當(dāng)從小鼠血管系統(tǒng)(Sox9fl......

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